化學(滅菌)指示指標和生物指示指標

滅菌過程應采用機械、化學(滅菌)和生物指標相結合的方法進行常規監測，以評估滅菌條件，并間接評估加工項目的微生物狀態。蒸汽滅菌機械監控器包括通過檢查溫度記錄表(或計算機打印輸出)對循環時間和溫度的每日評估，以及通過壓力表對壓力的評估。用于電子交易的機械監視器包括時間、溫度和壓力記錄器，這些記錄器通過計算機打印輸出、儀表和/或顯示器提供數據。一般來說，電子煙滅菌有兩個基本要素(即氣體濃度和濕度)無法在醫療保健中監測到滅菌器。

化學(滅菌)指示指標方便，價格低廉，它比生物指示指標更有可能在邊緣滅菌時間(如2分鐘)不準確地指示滅菌?；瘜W(滅菌)指示指標應與生物指示劑結合使用，但不應取代化學(滅菌)指示指標，因為它能表明在邊際滅菌時間進行滅菌，而且只有含有抗性孢子的生物指示劑才能衡量滅菌過程中微生物的殺滅力。

在每個包裝的外面都貼上了化學(滅菌)指示指標，以表明包裝經過了一個滅菌周期，但這些指標并不能證明滅菌已經完成。還應在每個包裝的內部放置化學(滅菌)指示劑，以驗證滅菌劑的滲透情況?；瘜W(滅菌)指示指標通常是熱敏或化學敏油墨，當一個或多個殺菌參數(如蒸汽時間、溫度和/或飽和蒸汽)改變顏色;存在始至時間、溫度、相對濕度和/或ETO濃度。根據化學(滅菌)指示指標監測一個或多個殺菌參數的能力。如果內部和/或外部指標表明處理不當，則不應使用該項目。必須每天在空的動力除氣滅菌器(如真空蒸汽滅菌器)中進行除氣試驗(B-D試驗)。

很多權威機構認為，生物指示儀器是最接近滅菌過程的理想監測儀，因為它們通過使用最具耐藥性的微生物(即細菌)直接測量滅菌過程,而不僅僅是測試殺菌所必需的物理和化學條件。由于用于生物指標的芽孢桿菌比在病人護理設備上發現的常見微生物污染物具有更強的耐藥性，且數量更多，因此生物指示劑已被滅活的演示強烈表明，負載中的其他潛在病原體已被殺死。

滅菌過程的理想生物監測應該易于使用,是便宜的,不受外源污染,最短周期內提供結果,以便糾正措施盡早完成,只有當滅菌參數(例如,steam-time,溫度和/或飽和蒸汽;時間、溫度、相對濕度和/或ETO濃度不足以殺死微生物污染物。

生物指標指標是唯一的過程指標，直接監測給定的滅菌過程的致命性。用于監測滅菌過程的孢子已顯示出對滅菌劑的耐藥性，并且比在醫療設備上發現的生物包菌有更強的耐藥性。阿托品孢子(106)用于監測ETO和干熱，硬脂嗜熱孢子(105)用于監測蒸汽滅菌、過氧化氫氣體等離子體和液體過氧乙酸滅菌器。G.硬脂嗜熱菌在55-60℃孵育，B.阿托品在35-37℃孵育。蒸汽和低溫滅菌器(如過氧化氫等離子體、過氧乙酸)應至少每周監測一次，并進行適當的孢子商業化制備。如果經常使用滅菌器，每天使用生物指示劑可以更早地發現設備故障或程序錯誤，從而最大限度地減少在生物指標為陽性的情況下所需的病人監測和產品召回。如果每個負載包含可植入對象，則應該監視它。如果可行，在已知孢子試驗結果為陰性之前，不應使用可植入物。

最初，孢子條帶生物指標需要長達7天的培養才能從邊緣周期(即，當時幾乎沒有孢子存活)。下一代生物指示劑包含在塑料小瓶中，其中包含一個孢子涂布紙帶和一個可破碎玻璃安瓿中的生長介質。該指標的潛伏期最長為48小時，但在24小時內可以檢測到明顯的故障。一種通過讀取非熒光底物酶解產生的熒光產物來檢測嗜硬脂酸桿菌酶存在的快速讀出生物指示劑已經上市10多年了，研究表明rapid-readout的敏感性測試蒸汽滅菌(132°C重力滅菌器1小時,3小時121°C重力和132°C真空滅菌器)相似,傳統sterilization-specific生物指標和熒光快速讀出的結果準確預測24 – 48小時和7天?？焖僮x出生物指示劑是一個雙指示劑系統，因為它還可以檢測硬脂嗜熱孢子生長過程中產生的酸代謝物。該體系不同于由細菌來源的無孢子酶系組成的指標體系。使用次優滅菌周期(如降低時間或溫度)與基于酶的指標體系的獨立比較數據尚未發表。

為快速、可靠地監測電子煙滅菌過程，設計了一種新型快速讀出電子煙生物指示劑。該指標已被FDA批準在美國使用?？焖僮x出的生物指示劑檢測阿托品B.的存在，通過檢測熒光信號，表明存在于阿托品B.機體內的酶的活性，β-糖苷酶。該指示劑還能檢測出阿托品孢子在生長過程中產生的酸性代謝產物。根據制造商的數據，只要有活孢子存在，這種酶就會被檢測出來?？焖僮x出的電子煙生物指示劑可用于100%的電子煙和ETO- hcfc混合滅菌循環的監測，專門為監測閃光滅菌而設計的生物指示指標現已問世。

由于滅菌失敗可能發生(蒸汽滅菌約占1%)，疾病控制和預防中心和手術期注冊護士協會(AORN)已經提供了一種程序，在使用蒸汽滅菌的芽孢試驗呈陽性的情況下可以遵循該程序。1981年美國疾病控制與預防中心的建議是:“除非蒸汽滅菌器或滅菌程序有缺陷，否則除了可植入物外，其他物品不需要因為一次孢子檢測呈陽性而被召回?！薄斑@一建議的理由是，滅菌器中的單個陽性孢子檢測偶爾發生。它們的發生可能是由于芽孢的抵抗力略有變化，滅菌器使用不當，以及在培養過程中受到實驗室污染(獨立孢子試驗不常見)。如果機械(例如，蒸汽滅菌器中的時間、溫度、壓力)和化學(內部和/或外部)指標表明滅菌器正常工作，單次陽性孢子試驗可能并不表明滅菌器故障，但孢子試驗應立即重復。如果孢子檢測仍然呈陽性，則應停止使用滅菌器，直至使用完畢。同樣，AORN指出，單次孢子檢測呈陽性并不一定意味著滅菌器失效。如果檢測呈陽性，應立即重新對滅菌器進行檢測，使其正常使用和使用。除植入式產品外，其他產品無需召回，除非發現滅菌器故障。如果發現滅菌器故障，必須將其視為非無菌物品，并應盡可能召回可疑裝載的物品，并對其進行再處理。

如果在檢索前使用了病人護理項目，感染控制專業人員應與中央處理、外科服務和風險管理人員合作評估感染風險。應考慮的因素包括化學(滅菌)指標的結果(如非反應性化學指標可能表示溫度未達到);其他生物指示指標為陽性后的結果(如周二為陽性，周三為陰性);與陽性生物指標相關的滅菌器參數(如在正確溫度下縮短時間);時間-溫度圖(或打印輸出);與去污手術器械相關的微生物負荷(如85%的去污手術器械CFU低于100)。蒸汽滅菌的安全度很高，以致于與顯示孢子生長的貨物有關的感染風險極小，特別是貨物經過適當清洗并達到了溫度(如可接受的化學指標或溫度圖表所示)

錯誤的檢測或錯誤的指標可能導致假陽性生物指示指標。后者可能發生在不適當的儲存、加工、產品污染、材料損壞或孢子的抵抗力變化。革蘭氏染色和陽性生物指標的亞種培養可確定污染物是否產生假陽性結果。然而，在一次事件中，作為生長培養基的肉湯中含有一種污染物B.凝血劑，導致肉湯在55°C時渾濁，對來自不同廠家的成對生物指標的測試可以幫助評估產品缺點。當使用獨立的生物指標時，由于外部污染而導致的假陽性生物指示指標并不常見。

生物指標測試包的大小和組成應標準化，已對空氣去除和滅菌劑滲透造成重大挑戰，AAMI推薦了一個標準的16塊毛巾包，用于蒸汽消毒813,819,987。每條毛巾都是縱向折疊成三分之一，然后橫向折疊在中間。一個或多個生物指標被放置在8到9條毛巾之間，在包的近似幾何中心。當把毛巾疊起來放在另一個上面時，形成一個堆疊(大約6英寸高)，重量大約為3磅，密度大約為每立方英尺11.3磅。這個測試包還沒有得到普遍的使用，作為一個標準包，模擬蒸汽滅菌器的實際使用情況。商業上可用的一次性測試包，已被證明相當于AAMI 16毛巾測試包也可以使用。測試包應平整地放置在另一個滿載滅菌器的滅菌室中，放置在最不利于滅菌的地方。該區域通常位于滅菌器的前部、底部，靠近排水管道。檢測所用批次的對照生物指標應不暴露于滅菌劑中，然后孵育，以驗證檢測孢子的滅菌前生存能力，并進行適當的孵育。最保守的方法是每次運行都使用一個控件;然而，較少的使用可能是足夠的(例如，每周)。此外，還有一個常規的電子放射治療測試包，其中生物指示劑放置在帶有柱塞的塑料注射器中，然后放置在干凈手術毛巾的折疊處，并進行包裹。另外，也可以使用已被證明與AAMI測試包等效的商用處理測試包。測試包放置在滅菌器負載的中心。滅菌記錄(機械、化學和生物)應保存一段時間，以符合標準和州和聯邦法規。

在歐洲，生物監測器并不經常用于監測滅菌過程。相反，滅菌器項目的釋放是基于監測滅菌過程的物理條件，稱為“參數釋放”?！皡祷判幸鬁缇O施有一個明確的質量體系，并對滅菌物品的滅菌過程進行驗證。目前在歐洲，蒸汽、干熱和電離輻射過程的參數釋放是可以接受的，因為物理條件是可以理解的，而且可以直接監測。例如，使用蒸汽滅菌器，可以用探頭監測負載，探頭將產生關于溫度、時間和室內代表性位置的濕度數據，并與驗證過程中制定的規范進行比較。

定期到使用消毒器的地區進行感染控制查房，以使消毒器的使用標準化，可查明操作員能力可糾正差異;滅菌記錄文件，包括化學(滅菌)和生物指示指標測試結果;消毒機保養及包裝;以及包的裝載編號。這些評審還可以確定改進活動，以確保操作人員遵守既定的標準。